Assassin's Creed é um jogo de ação e aventura não linear em que o jogador controla Altaïr Ibn-La'Ahad, um Assassino do Levante do século XII, durante a Terceira Cruzada. Sua vida é vivida por meio do Animus por seu descendente do século XXI, Desmond Miles.
Desmond Miles, um bartender, é sequestrado pela empresa Abstergo Industries para servir de sujeito de teste no "Animus", um dispositivo capaz de simular memória genética. A intenção da Abstergo é colocar Desmond no aparelho para acessar as memórias de seu ancestral, Altaïr Ibn-La'Ahad, membro da Irmandade dos Assassinos no ano de 1191, durante a Terceira Cruzada na Terra Santa. No começo, Desmond tem dificuldade para se adaptar ao dispositivo, mas aos poucos revê os feitos de Altaïr ao longo dos dias seguintes. A maior parte do jogo passa então a acompanhar Altaïr, com transições ocasionais para Desmond, por causa de problemas no Animus ou do início do Bleeding Effect.
O jogo começa com Desmond entrando na memória de Altaïr, mas logo enfrenta problemas de sincronização. Nesse momento, é possível ouvir Lucy Stillman e Warren Vidic discutindo sobre a segurança de Desmond dentro do Animus. Depois de passar por algumas falhas, Desmond sai da máquina virtual, e Vidic explica seu funcionamento antes de iniciar o programa de tutorial. Quando Desmond termina o tutorial, ele acessa a memória sincronizável mais próxima de Altaïr; Lucy acrescenta que Desmond precisa reviver momentos-chave da vida de Altaïr para aumentar a sincronização, até alcançar a memória final, que contém as informações que a Abstergo procura.
Altaïr é mostrado pela primeira vez tentando recuperar um dos artefatos conhecidos como "Pieces of Eden" no Templo de Salomão, com a ajuda de Malik Al-Sayf e de seu irmão, Kadar, mas eles são impedidos por Robert de Sablé, Grão-Mestre dos Cavaleiros Templários e inimigo jurado dos Assassinos. Durante a tentativa de recuperar o tesouro, Altaïr quebra todos os três preceitos do Creed dos Assassinos ao tentar matar Robert, mas acaba fracassando. Na confusão que se segue, o irmão de Malik é morto, e o braço esquerdo de Malik fica inutilizado e mais tarde precisará ser amputado. Quando Altaïr retorna à fortaleza dos Assassinos em Masyaf para pedir desculpas, Malik, que sobreviveu a de Sablé, volta com o artefato e critica Altaïr por sua arrogância.
Depois de derrotar por pouco um ataque de retaliação dos Templários, Al Mualim, líder dos Assassinos, rebaixa Altaïr à condição de novato, mas lhe dá outra chance de subir na hierarquia da Irmandade. Al Mualim encarrega Altaïr de assassinar nove figuras importantes pela Terra Santa, em Jerusalém, Acre e Damasco, com o objetivo de trazer paz entre as forças cruzadas e sarracenas. Cada alvo é baseado em uma figura histórica real da Terceira Cruzada, incluindo Majd Addin, Garnier de Naplouse, Jubair al Hakim, Abu'l Nuqoud, Sibrand, William de Montferrat e Robert de Sablé.
Altaïr conclui cada missão e descobre como cada alvo está ligado a Robert e aos Templários, além de perceber que todos fazem parte de um plano para pôr fim às Cruzadas e colocar a Terra Santa sob controle próprio. Com homens de ambos os lados mortos, ele descobre que o último plano de Robert é tentar unir as forças cristãs e muçulmanas contra um novo inimigo em comum: os próprios Assassinos. Altaïr derrota de Sablé diante de Ricardo Coração de Leão, sem conseguir convencer o rei de que o fim da guerra seria bem recebido por ambos os lados, mas consegue impedir o plano de Robert. A partir de de Sablé, Altaïr descobre que Al Mualim também era membro dos Templários e usou o Assassino para matar os outros membros que conheciam o segredo do poder do tesouro, a fim de manter o artefato só para si.
Altaïr retorna rapidamente a Masyaf e confronta seu mestre, que revela a verdade: a Piece of Eden, recuperada com a ajuda direta de Altaïr antes de sua transgressão, cria ilusões. Ele denuncia a religião e outros acontecimentos aparentemente sobrenaturais, como as Dez Pragas do Egito, a abertura do Mar Vermelho e a presença dos deuses gregos na Guerra de Troia, como ilusões causadas pelo artefato. Em seguida, afirma que pretende usar o objeto para colocar a humanidade em um estado de obediência mental e, assim, acabar com todo conflito. Altaïr acaba enxergando além dos enganos criados pelo artefato e consegue matar Al Mualim. Quando recupera a peça, o Piece of Eden é ativado e mostra uma projeção holográfica do mundo, com vários locais de outras Pieces of Eden marcados ao redor do planeta.
Quando o processo termina, Desmond descobre que a Abstergo é uma fachada moderna dos Templários e que eles já estão procurando outros artefatos nos locais identificados nas memórias de Altaïr. Ele também fica sabendo que os Assassinos da era atual tentaram resgatá-lo antes do fim da memória, mas fracassaram. Em seguida, Desmond deveria ser morto por ordem de um Templário de alto escalão, Alan Rikkin, mas Lucy Stillman o salva da execução e, em um momento, dobra o dedo anelar em direção à palma, fazendo referência à tradição dos Assassinos de cortar o dedo.
Embora Desmond continue preso no laboratório da Abstergo, sua experiência no Animus cria um Bleeding Effect da vida de Altaïr na sua própria, permitindo que Desmond use a Visão de Águia de Altaïr. Isso, por sua vez, faz com que ele veja mensagens estranhas pintadas nas paredes do quarto e no chão do laboratório. As mensagens tratam de várias formas do fim do mundo em diferentes culturas, incluindo diversas referências a 21 de dezembro de 2012, a data em que a Abstergo planeja lançar um satélite para "encerrar permanentemente a guerra". É sugerido que esse método seria o mesmo usado por Al Mualim para hipnotizar Masyaf, mas em uma escala muito maior. No fim, o jogo termina com Desmond se perguntando o que as imagens significam e quem as teria desenhado.
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| Plataforma | Data | Região |
|---|---|---|
| PlayStation 3 | 12/11/2007 | América do Norte |
| Xbox 360 | 12/11/2007 | América do Norte |
| PlayStation 3 | 15/11/2007 | Europa |
| Xbox 360 | 15/11/2007 | Europa |
| PlayStation 3 | 20/11/2007 | Austrália |
| Xbox 360 | 20/11/2007 | Austrália |
| PlayStation 3 | 28/11/2007 | Japão |