Pela primeira vez, heróis e vilões de diferentes desenhos da Nickelodeon se unem em uma aventura que mistura vários cenários da emissora, com interação entre os personagens e resolução de enigmas em equipe. Entre os personagens jogáveis estão SpongeBob SquarePants, The Fairly OddParents, Rocket Power, Jimmy Neutron e Tak. Nicktoons Unite! também marca a estreia nos videogames de Danny Phantom e Rugrats All Grown Up.
O jogo começa com SpongeBob descobrindo que Plankton está tomando Bikini Bottom com enormes máquinas de sucção. Goddard sai de um portal atrás da casa de SpongeBob e mostra a ele uma mensagem de Jimmy Neutron. Ao seguir Goddard pelo portal, SpongeBob encontra Jimmy Neutron, Timmy Turner e Danny Phantom no laboratório de Jimmy. Jimmy cobre SpongeBob com umidade regenerativa para impedir que ele desidrate. Ele então explica que sua invenção mais recente, a Universe Portal Machine, foi copiada pelo Professor Calamitous, que formou um sindicato com Plankton, Vlad Plasmius e Denzel Crocker, e já está roubando energia dos mundos deles.
Os heróis tentam se teletransportar para Casper High, mas acabam no castelo de Vlad, onde ele revela que seu portal fantasma está drenando energia da Ghost Zone e que capturou os pais de Danny. Vlad nocauteia o grupo e os aprisiona na Ghost Zone Prison. Depois de fazer amizade com o Box Ghost e derrotar Walker, os heróis conseguem fugir. Danny leva o grupo ao portal fantasma da Fenton Works, onde eles conhecem Sam Manson e Tucker Foley. Ao retornar ao castelo, o grupo destrói os geradores do portal. Danny assume o controle do corpo de seu pai e usa suas Ghost Gauntlets para atacar Vlad, mas ele consegue escapar.
Em seguida, os heróis viajam para Bikini Bottom usando a goma de ar de Jimmy para respirar debaixo d'água. Sandy Cheeks os envia a Jellyfish Fields para encontrar Patrick Star, mas ele acaba sugado por uma colheitadeira que captura águas-vivas. Depois de destruir as colheitadeiras, o grupo vai parar no navio do Flying Dutchman. Danny o convence a deixá-los ir em troca de trazer de volta seus antigos tripulantes. Ao chegarem ao Chum Bucket, eles libertam Patrick e as águas-vivas. No telhado, enfrentam Plankton pilotando um enorme caranguejo robô para resgatar Mr. Krabs e descobrem que os vilões estavam extraindo energia para alimentar uma Doomsday Machine.
Em Dimmsdale, os heróis infiltram-se na fortaleza dourada de Crocker e cortam seu fornecimento de energia. Depois seguem para Fairy World, onde encontram Jorgen von Strangle, libertam as fadas e derrotam Crocker pilotando um exoesqueleto em The Big Wand. O grupo então retorna ao laboratório de Jimmy e conhece Cindy Vortex. Jimmy percebe que Calamitous colocou um flea-bot em Goddard para espioná-lo. Os heróis usam o raio encolhedor de Jimmy para entrar em Goddard, derrotar o flea-bot e hackeá-lo para localizar a base de Calamitous. O grupo derrota o sindicato, e SpongeBob desliga a Doomsday Machine. Com Calamitous preso, Jimmy entrega a cada um dos heróis um Neutronic Recaller para o caso de um novo incidente, e todos seguem seus caminhos.
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| Plataforma | Data | Região |
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| Nintendo DS | 09/01/2006 | América do Norte |
| Nintendo DS | 02/03/2006 | Europa |